倒置熒光顯微鏡現(xiàn)在使用起來需要我們了解一些專業(yè)知識和物理知識。一般來說我們不需要了解里面的成像原理，但對于倒置熒光顯微鏡主要部件的作用，當問題出現(xiàn)的時候，我們自己也就能夠“啟動”進行調(diào)整。今天我們就來看看倒置熒光顯微鏡的使用包括哪些需要注意的細節(jié)，大家也可以關(guān)注下。

1、正確觀察白光的步驟？

將標本放在臺上，打開電源開關(guān)；將轉(zhuǎn)盤聚光器調(diào)整到亮視場，再將環(huán)形光圈調(diào)整到最大光圈；從低功耗鏡像開始。

2.相位差環(huán)中的字母BF/PHL/PH2到底是什么意思？

倒置熒光顯微鏡結(jié)合了熒光附件和相差顯微鏡的特點。那么相位差環(huán)中的這些字母分別代表：PHL(40.13)，PH1(200.45)，PH2(400.6)，BF代表白光。因此，如果我們觀察熒光，可以選擇前三個差異。所謂相位差可以理解為放大了透明結(jié)構(gòu)，因為細胞本身的內(nèi)部結(jié)構(gòu)是透明的，所以我們想要觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的時候需要用到相位差。

3.無論如何調(diào)整細焦距螺旋，鏡下圖像都不清晰。

在這種情況下，鏡頭可能不干凈，故我們就可以用酒精棉擦拭鏡子。此外，大功率物鏡外還有一個旋鈕，適當轉(zhuǎn)動這個旋鈕也會使畫面清晰。

4.如何正確觀察熒光？

關(guān)閉室內(nèi)燈，打開白光電源和汞燈電源。一般需要提前10分鐘打開水銀燈預(yù)熱；關(guān)閉熒光快門，用低倍鏡找到細胞位置；關(guān)閉透光按鈕，打開熒光光路快門，旋轉(zhuǎn)熒光濾色片轉(zhuǎn)盤；計算機監(jiān)視器中的觀察。

熒光光路快門應(yīng)在最后面打開，然后先關(guān)閉，這樣可以保護樣品，避免過度的熒光猝滅。

5.水銀燈怎么保養(yǎng)？

汞燈在工作時會散發(fā)大量的熱量，所以需要保持室內(nèi)溫度不要太高，有一個良好的散熱環(huán)境。水銀燈的工作壽命一般為200小時，但使用時間越短，觀察越快，水銀燈的壽命越長。相反，工作時間越短，汞燈壽命降低的越快，所以開關(guān)的數(shù)量要盡可能減少。

6.為什么在目鏡下觀察到的圖像只有一半？

出現(xiàn)這種情況的原因是CT回路的調(diào)整出現(xiàn)了問題。CT環(huán)位于目鏡下方，也叫同軸對準目鏡，有CT/O/S三種參數(shù)設(shè)置，CT對應(yīng)瞄準望遠鏡的光路；o對應(yīng)光路中沒有物體；s對應(yīng)光路中的擋光板。那么以上情況就是CT環(huán)的螺旋位于CT和S參數(shù)之間。

7.白光觀察下的物體為什么這么暗？

環(huán)形隔膜沒有向最大的大孔徑開口。環(huán)形光闌位于光源和聚光器之間，使光線通過聚光器聚焦在標本上；或者光強調(diào)節(jié)旋鈕關(guān)閉。